淫羊藿多糖对寒凝血瘀大鼠肝脏基因表达的影

2022/6/30 来源:不详

摘要:目的归纳大鼠寒凝血瘀模型在基因表达层面的肝脏功能变化和潜在的分子标记,并探讨淫羊藿多糖(EFPS)对基因表达的影响。方法雄性SD大鼠随机分为3组:对照组、模型组和EFPS(38.7mg/kg)组,将模型组和EFPS组大鼠连续15d每天14∶00时置于冰水浴1h,造模的同时每天给药1次。取3组大鼠肝脏进行转录组测序,通过构建差异表达基因(DEGs)的基因本体(GO)中生物过程(BP)与京都基因和基因组百科全书(KEGG)网络,同时结合基因富集分析(GSEA),分别分析并比对各组大鼠的肝脏功能变化。结果与对照组比较,模型组大鼠肝脏基因表达变化表现为脂质代谢下调、细胞生长受负向调控、产生免疫反应以及对于温度的自稳态调节;与模型组比较,EFPS组大鼠肝脏基因表达变化表现出免疫回调、激素调控和基因表达调控发生改变。通过二者DEGs的等量共表达模式初步确立EFPS干预寒凝血瘀模型的分子标记为Ccl5、Cxcl13、Jund。结论长期冰冷导致的体寒通过大鼠肝脏表现出脂质代谢下调、细胞生长减缓、促进炎症反应,EFPS发挥免疫和激素调节作用。

寒凝血瘀是中医学证候中常见的病证,多由寒邪侵袭机体而引起体内血行不畅、血脉不通、血液瘀滞等病理变化[1]。目前体寒模型的创建主要以生理指标为参照(如大鼠掌心温度、代谢激素水平等[2]),而从基因水平探讨中医寒凝血瘀模型的生物学内涵研究较少。

多糖及其缀合物被认为是生物体内除核酸以外的又一类重要的信息分子。由于它们常是细胞表面信号识别、抗原抗体反应、细胞间信息的传递和感受的关键因子,因此具有生物活性的多糖研究日益受到重视[3]。淫羊藿多糖(EpimediiFoliumpolysaccharide,EFPS)是小檗科植物淫羊藿的主要活性成分之一。药理学研究显示,EFPS具有抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、调节免疫、延缓衰老等多种作用[4]。经本课题组前期研究[5]发现,相较于淫羊藿其他拆分组分,EFPS对寒凝血瘀模型物质能量代谢的下降具有更显著的回调作用;而转录组学结果显示,作用于寒凝血瘀模型时EFPS与淫羊藿全成分共有差异表达基因(DEGs)相对其他组分最多,说明EFPS可能通过作用于共同靶基因发挥与淫羊藿相似的药效。为进一步深入研究寒凝血瘀的本质以及EFPS对于寒证的药效,本研究在基因表达层面归纳了大鼠寒凝血瘀模型肝脏功能变化,并探讨EFPS对此模型的药理作用及机制。

1 材料

1.1 实验动物

30只雄性SD大鼠,SPF级,体质量(±20)g,由黑龙江中医药大学实验动物中心提供,实验动物生产许可证号SCXK(黑)-。保持饲养环境温度22℃,相对湿度40%左右,8∶00到20∶00人工灯光照明,标准大鼠饲料喂养,自由饮水,在代谢笼中适应1周后用于实验。本实验通过动物保护委员会的伦理批准,批准文号为。

1.2 实验药物与主要试剂

淫羊藿药材购自世一堂中药材有限公司,批号,产地甘肃,经黑龙江中医药大学中药资源学教研室王振月教授鉴定为小檗科植物淫羊藿Epimediumbrevi

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